梯度PCR是在一臺PCR儀上同時進(jìn)行同一PCR反應(yīng)時,以引物的理想退火溫度Tm-5作為為參考值,設(shè)置不同退火溫度,這些溫度對應(yīng)PCR儀模塊的不同的孔,且呈現(xiàn)梯度遞增或遞減,zui終摸索出針對這臺PCR儀和當(dāng)前外在環(huán)境的合適的退火溫度。
雖然我們可以通過梯度PCR快速摸索出適合儀器的退火溫度,減少繁瑣的重復(fù)試驗(yàn),但在實(shí)際應(yīng)用中仍然會遇到惱人的問題。經(jīng)常會有人困惑同一反應(yīng)體系在原來的PCR儀上摸索出合適的退火溫度,當(dāng)換到另一臺PCR儀(同一型號/不同品牌/不同型號)上進(jìn)行相同的擴(kuò)增反應(yīng)時,或者更換耗材(PCR管等)后擴(kuò)增效果并沒有之前理想。究其原因,主要是由于熱傳導(dǎo)效率的不同而導(dǎo)致反應(yīng)管內(nèi)樣品的溫度和PCR儀模塊差異所造成的。梯度PCR摸索出的條件只有在PCR實(shí)驗(yàn)、儀器、試劑和耗材等一致時才是有效的,否則任何一個組成要素的改變都將會帶來新的不確定性。顯然要*解決以上問題,需要一款能夠?qū)崿F(xiàn)率的熱能傳導(dǎo),并保持模塊溫度與樣品溫度高度一致的PCR儀來進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。這時我們無需梯度PCR就可以解決模塊和樣品之間存在的溫度差異及差異的不確定性等諸多問題,同時這也大大簡化了PCR程序,更加省時、省試劑。
寶予德Life Eco PCR儀不僅具有30℃的zui寬限梯度功能,而且擁有的控溫系統(tǒng),采用專有的TAS(溫度補(bǔ)償技術(shù)),有效避免了加熱模塊熱傳導(dǎo)的邊緣效應(yīng)問題,為PCR實(shí)驗(yàn)提供*的穩(wěn)定性和均一性,確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性和重復(fù)性。
BLOCK邊緣的傳熱不均一
(TAS技術(shù))模塊整體溫度均一
此外,用戶可根據(jù)反應(yīng)體系選擇Blook或Tube控溫模式,配合選用的試劑和的PCR管,實(shí)現(xiàn)*的擴(kuò)增條件。